微生物生長曲線是描述微生物在特定環(huán)境條件下,群體數(shù)量隨時間變化規(guī)律的動態(tài)模型,通常分為遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期四個階段。通過分析生長曲線,可揭示微生物的代謝特性、環(huán)境適應(yīng)性及生長調(diào)控機(jī)制,為工業(yè)發(fā)酵、疾病防控、環(huán)境治理等領(lǐng)域提供理論依據(jù)。
微生物生長曲線的分析方法:
直接計數(shù)法
血細(xì)胞計數(shù)板:通過顯微鏡直接計數(shù)活菌與死菌總數(shù),操作簡單但無法區(qū)分死活。
熒光染色法:用碘化丙啶(PI)等染料標(biāo)記死菌,結(jié)合流式細(xì)胞儀區(qū)分活菌與死菌。
間接計數(shù)法
平板菌落計數(shù)(CFU法):將稀釋菌液涂布平板,統(tǒng)計菌落數(shù)(CFU/mL),反映活菌數(shù)量,但耗時較長(需培養(yǎng)18-24小時)。
比濁法:通過分光光度計測量菌液光密度(OD???),快速反映菌體濃度,但受細(xì)胞大小和培養(yǎng)基顏色干擾。
代謝活性檢測
呼吸強(qiáng)度測定:通過測量耗氧量或CO?釋放量反映代謝活性。
ATP生物發(fā)光法:利用熒光素酶催化ATP與熒光素反應(yīng)發(fā)光,光強(qiáng)與菌體濃度成正比,適用于快速檢測。
分子生物學(xué)方法
qPCR:定量檢測特定基因(如16S rRNA)拷貝數(shù),反映菌體數(shù)量變化。
流式細(xì)胞術(shù):結(jié)合熒光標(biāo)記檢測細(xì)胞大小、DNA含量及代謝活性,實現(xiàn)單細(xì)胞水平分析。